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麦胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA试剂盒说明书

麦胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA试剂盒说明书

发布时间:2020-07-29

产品名称:麦胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA试剂盒

供应商:远慕生物

产品规格:96T/48T
保存条件:2-8℃
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。

实验原理:
WGA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。已知WGA浓度的标准品,未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将WGA和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A,B和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中WGA的浓度呈比例关系。


实验操作注意事项:
1、试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存。实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。
2、加样:加样时,要控制加样速度,避免第一孔与最后一孔之见的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响实验的准确性以及重复性;一般加样时间控制在10分钟内,如果样本数量过多,可使用多道移液器。
3、孵育:样品要在密闭的容器内进行孵育,严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4、洗涤:洗涤过程中反应孔中的残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,同时要消除板底残留的液体和手指痕迹,避免影响最后的酶标仪读数。
5、反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,10分钟左右),如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。
6、建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。
7、建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商联系,如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。

结果判断
1、30分钟内在波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值;
2、以OD值为纵坐标,以标准品的浓度为横坐标,绘制曲线图;
3、根据样品的OD值查找对应的浓度范围;


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